אלקטרופורזה: מה זה? לשם מה זה? תוצאות פרשנות

, כדי להעריך את הכמות והאיכות. בפרט, בדיקה זו מאפשרת הפרדת חלבונים לחמישה שברים: אלבומין, גלובולינים אלפא 1, גלובולינים אלפא 2, גלובוליות בטא וגאמא גלובולינים.שינוי הקשר בין סוגי חלבונים אלה מעיד על כמה מצבים פתולוגיים. ניתן לבצע אלקטרופורזה על דגימות של סרום דם, שתן או נוזלים ביולוגיים אחרים, כגון CSF (נוזל מוחי שדרתי).

שוטרסטוק

בדיקה זו נקראת גם אלקטרופורזה חלבונית או פרוטיוגרמה, בדיקה זו מתבצעת על ידי אימוץ שיטה מאוד מסוימת: שדה חשמלי מוחל על הדגימה, שבזכותה החלבונים "מקובצים" לפי סוג. כל אחד מהחלבונים מאפשר לנתח את האלקטרופורזה. , בעל מסה מולקולרית משלו ומטען חשמלי, המאפשר להם להגיב ללחץ הניתן על ידי זרם ישיר באופן אופייני. בתנאים רגילים, למשל, השיא הצפוי הראשון - גבוה וצרה יותר - במעקב האלקטרופורטי מתאים לאלבומין.

במונחים מעשיים יותר, "אלקטרופורזה היא ניתוח" המשמש לקביעת:

• נוכחותם של חלבונים חריגים;
• היעדר חלבונים רגילים;
• אם קבוצת חלבונים קיימת בכמויות פחותות או גדולות מהרגיל.

הרופא יכול לבקש אלקטרופורזה כחלק מבדיקות הבקרה (ניתוח שגרתי) או מתהליך האבחון, כלומר במקרה שבדיקות מעבדה אחרות הראו שינויים ויש צורך לחקור או לאשר חשד קליני.

, חוט השדרה, עצבים גולגולתיים ושורשי עמוד השדרה).

אלקטרופורזה: מה נמדד

חלבוני פלזמה הם אינדיקטורים חשובים מאוד: כל שינוי בריכוזיהם יכול לאותת על קיומן של מחלות רבות.

עם אלקטרופורזה ניתן להפריד את החלבונים הבאים במדגם:

• אלבומין L;
• גלובולינים אלפא 1;
• גלובולינים אלפא 2;
• בטא גלובולינים;
• גלובולינות הגמא.

כיום, מעבדות רבות מבצעות הפרדה ב -6 להקות, כלומר עם הפרדת בטא גלובולינים לשני שברים:

• בטא 1 גלובולינים;
• בטא 2 גלובולינים.

האם ידעת ש…

במעבדה, אלקטרופורזה היא אחת הטכניקות הנפוצות ביותר לניתוח ההרכב האיכותי והכמותי של חלבונים. שיטת הפרדה זו מבוססת על מהירות ההגירה השונה של חלקיקים טעונים בחשמל, באמצעות פתרון ומדיום תמיכה, תחת " השפעת שדה חשמלי.

אלבומין הוא החלבון השופע ביותר במי גבינה ואחד החשובים בגוף. זה מסונתז על ידי הכבד והוא מכיל בעיקר נוזלים ביניים ופלזמה, שם הוא לבד מהווה כמחצית מהחלבונים המסתובבים. אלבומין מבצע פונקציות שונות, כולל ניהול נכון של לחץ אוסמוטי והעברת חומרים, כגון בילירובין.

האלפא גלובולינים 1 ו -2 מבצעים בעיקר פונקציית הובלה של שומנים, שומנים בדם והורמונים. בטא גלובולינים נושאים גם חומרים הנמצאים בדם; בין החלבונים המוכרים ביותר בקבוצה זו הם טרנספרין (האחראי על הובלת ברזל) ומיקרוגלובולין בטא -2. לעומת זאת, לגמא גלובולינים יש בעיקר פונקציה של נוגדנים.

חלק מחלבוני הפלזמה מיוצרים על ידי הכבד (כגון אלבומין), ואילו אחרים משתחררים לדם על ידי תאים השייכים למערכת החיסון (גמא גלובולינים).

למידע נוסף: חלבוני פלזמה - פונקציות ומאפיינים

אלקטרופורזה: עקרון בסיסי

מבוא: באופן כללי, אלקטרופורזה היא שיטת הפרדה המבוססת על מהירות ההגירה השונה של חלקיקים טעונים בחשמל, באמצעות תמיסה ומדיום תמיכה נקבובי ואינרט (כגון נייר, ג'ל אגרוז או גיליון אצטט), בדחף של חשמל שדה. מולקולות רבות בעלות עניין ביולוגי (חומצות אמינו, פפטידים, חלבונים, DNA ו- RNA) מחזיקות קבוצות מיוננות במבנה שלהן, ולכן, בערכן pH מתאים, הן נמצאות בתמיסה כמינים טעונים בחשמל. בהשפעת שדה חשמלי מולקולות טעונות אלה נודדות לכיוון הקתודה או האנודה, תלוי אם יש להן מטען חיובי (קטיון) או שלילי (אניון).

אלקטרופורזה היא שיטה המאפשרת הפרדת מקרומולקולות ובמיוחד חלבונים על סמך:

• מסה מולקולרית;
• מטען חשמלי.

כאשר הם ממוקמים בסביבה בסיסית, חלבונים מתנהגים כמו חומצות: קבוצת COOH של חומצות האמינו השונות המרכיבות את מבנה המקרומולקולה, מתנתקת ל- COO– (חלקיק שלילי) ו- H + (יון חיובי). לכן החלבונים טעונים בסך הכל בכיוון שלילי והניידות האלקטרופורטית שלהם עוברת מהקוטב השלילי (הקתודה) לחיובי, כלומר לכיוון האנודה (מכיוון שהמטען השלילי חורג מהחיובי).

אם נחזור לבדיקה, הדגימה של המטופל - המכילה תערובת של חלבונים (למשל חלבוני סרום) - מונחת על פס אלקטרופורטי, כלומר תמיכת ההגירה.

ההפרדה לחמש להקות מתקבלת באמצעות יישום של שדה חשמלי, הנוצר על ידי זרם ישר, המאפשר לשברי החלבון השונים לנדוד בהתאם למסתם ולמטען החשמלי שלהם.

שוטרסטוק

התוצאה - הנקראת ELECTROPHORETIC TRACE - מורכבת מפסגות ועקומות שונות, המתאימות לשברי החלבון, המחולקים לפי סוג וכמות, הנמצאים בנוזל הנבדק:

• בדרך כלל, השיא הראשון, הגבוה והצר יותר, הוא זה של ה- ALBUMINA;
• לאחר מכן, שיאי GLOBULINS נצפים, נמוכים בהרבה מאלבומין.

העלייה או הירידה במשרעת ובעוצמת הפסגות הנוצרות במסלול מעידות על נוכחות גדולה יותר או פחות של החלבונים של כל קטגוריה.

האם ידעת ש…

בעבר הוגדר transthyretin כ- prealbumin בשל הניידות האלקטרופורטית שלו בהשוואה לאלבומין, מה שמאפשר לו לעבור למצב אנודי יותר.

למידע נוסף: Prealbumin - מה זה ;

טרשת נפוצה.

אלקטרופורזה: מתי נקבעת הבדיקה?

מבוא: מדידת סך החלבונים בדם - חלבונים - ואלבומין - אלבומינמיה - נכללת בדרך כלל בלוחות הבקרה, ולכן היא משמשת לעתים קרובות להערכת מצב בריאותו של אדם. בניתוחים שגרתיים, השינוי של פרמטרים אלה יכולים להיחשב כ- ALARM BELL ויכולים לגרום להעמקת התמונה הקלינית, במיוחד אם המטופל מראה סימפטומטולוגיה מסוימת.

ניתן לרשום אלקטרופורזה בסרום פרוטאין:

• במקרה שבדיקות מעבדה אחרות מספקות תוצאה לא תקינה, מבחינת היעדרות או כמות פחותה וגדולה יותר של חלבוני פלזמה מהרגיל;
• כאשר נוכחותם של:
  • דלקת בעיצומה;
  • הַדבָּקָה;
  • מחלת כשל חיסוני;
  • נפרופתיה;
  • מחלת כבד;
  • מחלות המאופיינות בייצור של רכיב חד שבט, כלומר נוגדנים בעלי אותו מבנה כימי בדיוק, כגון:
    • מיאלומה נפוצה וגרסאותיה;
    • מקרוגלובולינמיה של ולדנשטרום;
    • עמילואידוזיס.

אולם כאשר יש ריכוז גבוה של חלבון בשתן הרופא עשוי לבקש לבצע את אלקטרופורזה של פרוטאיני השתן. הבדיקה מאפשרת לקבוע את מקור השינוי, לאשר או לתמוך באבחנה.

למידע נוסף: Proteinuria (חלבון בשתן) - סיבות ומשמעות

ניתן לרשום אלקטרופורזה של LIQUOR PROTEIN כאשר יש חשד לאבחון טרשת נפוצה.במקרה זה, הדפוס האלקטרופורטי שנקבע אופייני, שכן הוא מדגיש את נוכחותם של הלהקות האוליגוקלונליות הנקראות בדרך כלל לא באלקטרופורזה של חלבונים. נַסיוֹב.

לאחר אבחון המחלה, ניתן לבצע אלקטרופורזה במרווחי זמן קבועים כדי:

• עקוב אחר הפתולוגיה לאורך זמן, ולאחר מכן עקוב אחר מהלכה (מעקב);
• בדוק את יעילות הפרוטוקול הטיפולי.

גלובולינים של אלפא 1

גלובולינים של אלפא -1 מהווים 2.0-3.5% מסך חלבוני הפלזמה.

• ערך הפניה גלובולינים אלפא 1: 0.2-0.4 גרם / ד"ל

גלובולינים אלפא 2

גלובולינים אלפא -2 מייצגים 6-11% מסך חלבוני הפלזמה.

• ערך הפניה אלפא 2 גלובולינים: 0.4-0.8 גרם / ד"ל

בטא גלובולינים

בטא גלובולינים מהווים 6-12% מסך חלבוני הפלזמה.

• ערך ייחוס בטא גלובולינים: 0.6-1 גרם / ד"ל

גלובולינים של גמא

גמא גלובולינים מהווים 9-20% מסך חלבוני הפלזמה.

• ערך הפניה גמא גלובולינים: 0.9-1.4 גרם / ד"ל

שימו לב: טווח ההתייחסות של הבדיקה עשוי להשתנות מעט בהתאם לגיל, מין ומכשור המשמשים את מעבדת הניתוח. מסיבה זו, עדיף להתייעץ עם הטווחים המדווחים ישירות על הדוח. כמו כן, יש לזכור כי את תוצאות הניתוחים יש להעריך כמכלול על ידי הרופא הכללי שמכיר את ההיסטוריה הרפואית של המטופל.

, כולל:

• הקאות מתמשכות ושלשולים
• כוויות נרחבות;
• הזעה מוגברת
• מחלת אדיסון;
• תרדמת סוכרתית.

במעקב האלקטרופורטי, ריכוז אלבומין גבוה מהרגיל יכול להעיד על:

• סרקואידוזיס (מחלה דלקתית מערכתית);
• מחלת בורגר או טרומבואנגיטיס אובליטרנס (מחלה הפוגעת בכלי הדם ובעורקים).

גלובולינים של אלפא 1

גלובולינים של אלפא 1 גדלים במקרים הבאים:

• תהליך דלקתי או זיהום מתמשך;
• התקף לב;
• נטילת גלולה למניעת הריון;
• הֵרָיוֹן.

אלפא 2 גלובולינים

ערכים גבוהים של גלובולינים אלפא 2 יכולים לאותת לנוכחותם של:

• מחלת כליות;
• דלקת או זיהום מתמשך;
• התקף לב;
• סוכרת;
• תסמונת דאון;
• כמה גידולים ממאירים.

בטא גלובולינים

הגידול בבטא גלובולינים בדפוס האלקטרופורטי מעיד על:

• כולסטרול גבוה בדם (היפרכולסטרולמיה);
• אנמיה מחוסר ברזל;
• מקרים מסוימים של מיאלומה נפוצה;
• הֵרָיוֹן.

טווח גלובלין

באלקטרופורזה, העלייה בגלובולינים גמא פוליקלוניים יכולה להיות קשורה ל:

• מחלות דלקתיות כרוניות;
• מחלות מסוימות במערכת החיסון;
• דלקת מפרקים שגרונית;
• זאבת מערכתית;
• מחלת כבד כרונית (כגון הפטיטיס ושחמת הכבד);
• זיהומים חריפים וכרוניים.

ערכים גבוהים של גלובולינים גמא חד שבטיים עשויים להצביע, עם זאת, על הימצאות:

• כמה גידולים;
• מיאלומה נפוצה;
• לימפומה;
• Waldenström macroglobulinemia.

כדי לזהות איזה גלובולין גמא קיים ברצועת המונוקלונל במעקב אלקטרופורטי, אפשר להמשיך ב"חיסוני חיסון ".

אלקטרופורזה בשתן

עלייה משמעותית בחלבון השתן באלקטרופורזה עשויה להצביע על תקלה בגלומרולי ובצינורות הכליות.

אלקטרופורזה של משקאות חריפים

אם אלקטרופורזה גורמת לחלבונים שאינם קיימים בדרך כלל בנוזל השדרתי או שהם מוגברים, ייתכן שיש "דלקת", זיהום או מחלה אחרת המשפיעה על מערכת העצבים.

מציאת להקות אוליגוקלונליות בדפוס האלקטרופורטי מעידה על טרשת נפוצה.

(בפרט: מחסור בחלבון עקב צריכת תזונה מופחתת);

ספיגה לא משנית ל: אנטרופתיה, צליאק, מחלת קרוהן, אי סבילות לחלבון;

קטבוליזם מוגבר: דלקות קשות, מצבי חום, cachexia, neoplasms, תת פעילות של בלוטת התריס, hypercortisolism, וכו '.

פסגות האלבומין יורדות גם בעקבות פתולוגיות המשפיעות על הכבד (יכולת הסינתזה פחותה) והכליה (חיסול עולה).

ריכוז האלבומין הנמצא עם אלקטרופורזה בסרום יכול לרדת, במיוחד כאשר נקבעים הדברים הבאים:

• שחמת הכבד (זו הסיבה השכיחה ביותר);
• הפטיטיס חריפה וכרונית;
• אנומליות גנטיות (סינתזה של אלבומינים פגומים);
• מחלת כליות (במיוחד תסמונת נפרוטית ודלקת גלומרולונפריטיס).

ממצא של "אלבומין נמוך עם אלקטרופורזה" נצפה גם בהריון עבור:

• שינויים הורמונליים המשנים את חדירות כלי הדם ואת הפונקציונליות של איברים רבים של האישה ההרה;
• שימוש מוגבר בחלבונים על ידי העובר.

גלובולינים של אלפא 1

גלובולינים של אלפא 1 מופחתים על ידי אלקטרופורזה בנוכחות:

• מחלת כבד קשה;
• אמפיזמה מולדת;
• מחלת כליות.

אלפא 2 גלובולינים

ערכים נמוכים של גלובולינים אלפא 2 יכולים להעיד על:

• תת תזונה;
• מחלת כבד קשה;
• המוליזה.

בטא גלובולינים

ריכוז מופחת של בטא גלובולינים במעקב האלקטרופורזה יכול לאותת:

• תת תזונה;
• שחמת הכבד.

טווח גלובלין

ערכים מופחתים של גמא גלובולינים יכולים להצביע על הימצאות מחלות שונות של המערכת החיסונית.

אלקטרופורזה בשתן

בדרך כלל, ריכוז קטן של חלבון נמצא בשתן עם אלקטרופורזה. לכן, תוצאה זו אינה מעידה על קיומן של מחלות מסוימות.

אלקטרופורזה של משקאות חריפים

בתנאים רגילים, ריכוז החלבונים הכולל ב- CSF נמוך מאוד. מציאת ערכים מופחתים לאלקטרופורזה אינה מתואמת אפוא עם משמעות פתולוגית מסוימת.

): כדי להשיג את העקוב האלקטרופורטי בסרום יש צורך לעבור דגימת דם פשוטה מווריד הזרוע. לאחר מכן, הסרום מתקבל על ידי הפרדת השבר המכיל את התאים מהנוזל.

אלקטרופורזה של חלבון בשתן (ניתוח שתן): יש לאסוף כמות קטנה של שתן בכלי סטרילי מתאים. על פי הוראות הרופא והמעבדה, ניתן לאסוף את הדגימה ללא תזמון מדויק (אקראי) או תוך 24 שעות.

אלקטרופורזה CSF (ניתוח נוזל מוחי שדרה): מחייב הסרה של כמות קטנה של CSF על ידי החדרת מחט לחלל השדרה (פנצ'ר מותני).

10-12 שעות לפחות. במהלך פרק זמן זה, כמות מים מתונה מותרת.

ניתן לבצע אלקטרופורזה בשתן שנאסף בזמן מסוים ביום (אקראי) או במהלך 24 שעות, ולכן יש צורך להשיג את המיכלים הסטריליים המתאימים מראש.

באשר לאלקטרופורזה CSF, עם זאת, אין צורך בהכנה מיוחדת.

מה יכול לשנות את תוצאות הבחינה?

תרופות מסוימות יכולות להשפיע על התוצאה של אלקטרופורזה, לכן מומלץ לדווח לרופא על כל טיפול מתמשך. תרופות שיכולות לשנות את הממצאים הקליניים כוללות, למשל, אמצעי מניעה דרך הפה, סטרואידים אנבוליים, אנדרוגנים, הורמוני גדילה, אינסולין ואנטיביוטיקה.

גורמים נוספים שיכולים להשפיע על הבחינה כוללים:

• היפרליפידמיה (נוכחות של הרבה שומנים בדם);
• מתן כמויות גדולות של נוזלים תוך ורידי;
• דיאטה צמחונית;
• דגימות המוליזה (אם מתבצעת אלקטרופורזה בסרום).

ג'וליה ברטלי

בוגרת לימודי ביוטכנולוגיה רפואית-פרמצבטטית, עבדה כמנהלת מחקר ופיתוח בתוספי מזון ובחברות מזון תזונתי.